本产品是增加了去除基因组DNA (gDNA)功能的逆转录反应预混液，内含本公司新型高效率逆转录酶，一步法合成cDNA。

常见RNA抽提方法纯化的Total RNA中经常会残留微量的gDNA，将其逆转录后获得的cDNA通过Real Time PCR进行基因表达分析时，若检测目的基因中存在假基因，或无法在横跨内含子的位置上设计引物，残留的gDNA会作为有效模板进行扩增，影响RNA定量的准确性。本产品中预混了具有强力DNA分解活性的热敏型DNase，该DNase生效快、效率高、易失活，只需一步操作，即可简便地获得无gDNA污染的cDNA。

使用本产品合成的cDNA适用于染料法和探针法qPCR分析。可以根据实验目的，选择与 SuperStar Universal SYBR Master Mix (#CW3360) 等定量PCR试剂组合使用。

▪ 可简便、迅速地去除基因组DNA和合成cDNA：所有反应试剂已预混，通过单管反应只需约15分钟，即可一步法实现gDNA去除和cDNA合成。

▪ 高热稳定性：可耐受50 ℃条件下进行逆转录反应。

▪ 可对RNA的整个区域进行均一逆转录：优化cDNA合成反应buffer和按最佳比例混合的Primer mix（Oligo dT及Random Primer），可对RNA的整个区域进行均一、高效率的逆转录。

▪ 与qPCR试剂的高适应性：采用了对qPCR影响最小的配方，向qPCR体系中带入多达20%液量的逆转录反应液，也能表现出很好的定量线性。因此，该试剂盒可适用于低丰度mRNA的定量检测。

1. 优异的逆转录效率

【实验一】以新冠病毒RNA为模板，分别使用CW3371与市面常见All-in-one产品同时进行逆转录，将得到的cDNA分别进行Taqman探针法和SYBR Green染料法qPCR定量分析，实验数据如图：

图1：探针法qPCR扩增结果

图2：染料法qPCR扩增结果

实验结果表明：CW3371逆转录产物可兼容SYBR染料法和Taqman探针法qPCR检测，且扩增CT值优于A公司同类产品，说明CW3371逆转录效率更优异。

2.兼容高GC/AT逆转录

【实验二】取使用CW3371逆转录获得的cDNA，稀释两个不同浓度，对29%、44%、59%、74%四个不同GC含量的目的基因进行qPCR检测，实验数据如图：

图3：不同GC含量目的基因扩增结果

实验结果表明：CW3371逆转录获得的cDNA，扩增不同GC含量的目的基因均得到较好的扩增效果，说明该逆转录体系无碱基偏好性，可实现高GC/AT模板的高效逆转录。